日立超速离心机区带转头使用注意事项

　　概述:区带离心技术目前在生物制药和农业领域的应用越来越广泛，区带转头是在水平转头技术基础上进一步提高，它是根据样品溶液的密度梯度将细胞、病毒和微粒进行分离收集的，区带离心的加样和下样及样品的收集过程均在转头旋转的条件下连续进行的。其特点是容量大并具有较高的稳定性和可靠性，因此在试验室研究工作中也广泛应用。

　　下面就将日立区带转头(P35ZT)在使用中需注意的问题简单分析如下:

　　1 操作过程中应注意的问题

　　1.1 样品温度和转头温度的设置

　　要把离心用的转头温度与将需加人的样品—密度梯度溶液的温度设置尽可能一致(若溶液温度较低，可将转头预先冷却)，若温度设置温差太大，可能会发生以下问题。

　　1.1.1 当加人的样品温度低于运行的转头温度时:会引起加人的样品溶液温度升高、体积膨胀，以至转头内的压力升高，造成离心后装配帽的中心钮按不下去，帽无法取下下表列出使用P35ZT转头加人水后温度升高体积变化的量:

　　1.1.2 当加人的样品温度高于运行的转头温度时:会引起加人的样品温度降低，体积减小和转头内的压力变为负压，造成日立离心机离心后装配帽和中心钮被转头轴吸住，帽无法取下。

　　温度降低，体积收缩的量与上表一中体积膨胀的量相同。

　　出现此种情况后，要在日立离心机3000rpm运转条件下取下帽，若无法取下，就要在3000rpm运行状态下，将转头温度升高至加入的溶液温度，再尝试将帽取下。

　　1.2 加样和下样过程中应注意的问题：

　　1.2.1 加样和下样过程中，转头内不得有气泡产生，因此在加样和下样过程中均要进行消泡处理。

　　A.加样时，管子的连接如图二所示，一定要使消泡装置安装在加样头之前且要将管子夹紧，直至加样头连接没有气泡排出后，方可取下加样头，若转头内有气泡存在，会使红垫圈承受异常压力，造成溶液的泄露，影响分离物质的密度梯度和样品的收集.致使离心工作失败。

　　B.下样离心后，安装上加样头来进行下样时，下样过程的管子连接如图三所示，消泡装置须在外侧，要保证在加样头上消泡管上有一空气缓冲区，用来吸收下样过程中由于样品的流动产生的气泡，消泡管的空气缓冲区的高度在l0em以上

　　1.2.2 加样品溶液时的压力控制:

　　高浓度的溶液，加样速度要控制得慢一些，也可安装一压力指示计进行监测，加样压力应在lk沙m2以下。

　　1.2.3 加样头安装时要注意的问题:

　　A.为防止红垫圈异常损耗和容易取下装配帽，要在每次安装加样头之前，用薄纸沽点儿水轻轻擦拭红垫圈表面B，保证红垫圈安装的位置在视觉上是水平的且处于中心处，在安装加样头时动作要快，将加样头垂直安装在红垫圈表面，要格外小心不要碰到红垫圈表面。加样头安装位置正且到位，不然会损伤红垫圈表面。

　　2 防止样品泄露和加样头屁动的预防措施

　　2.1 防护板

　　要保证防护板安装时的水平.还要保证日立离心机驱动轴是水平的，这可通过调节离心机的水平调节螺栓(离心机底部)来进行调整。防护板要牢固地固定在用于支撑的三个点上，且要锁紧螺柄，并且要保证与转头之间的高度在35--36mm之间，(这可根据其规定的高度)顺时针或逆时针旋转垫圈来调整，调整后一定要拧紧上面的三个螺丝。

　　2.2 加样头

　　加样头中安装了四根管子，两根高一点的管子用来加溶液和样品的，两根矮一点的管子是用来接冷水进行冷却转头的。其内部的轴承转动时要平滑，若轴承的转动与转头转速不同步时，转头轴上部的两个0型圈在很短的时间内就容易损坏。因此，当加样头有较大振动和噪音时，就要判断是否轴承损坏或轴承枯上样品造成轴承运转异常(轴承损坏需更换，轴承脏需清洁)，以及加样头内的弹簧拆下、拉长、弹簧的长度应在30-35- 或者将防护板的高度是否规定符合要求(35-36..)o

　　2.3 转头

　　2.3.1 红垫圈(大多数的问题均出在红垫圈上)的检查及正确安装

　　首先检查红垫圈的表面是否有划伤或凹痕。若红垫圈表面有异常磨损，可导致加入的具有渗透力的样品溶液泄漏，因此在安装红垫圈时要非常小心，要用手指肚向下按，千万不可用指尖(指甲极易损伤红垫圈)。红垫圈使用一段时间后会出现轻微划伤，此时可用800目以上镜向砂纸或在转头盖(光滑平且硬的平面)上轻轻打磨，这需要有一定的技巧的，特别需注意，修复的红垫圈表面不要留有打磨时的残留物。

　　其次红垫圈的安装也非常重要。红垫圈的周边和底部要安装两个0型圈，两个0型圈安装前要涂抹少量的真空脂，红垫圈往轴上安装时要用点力向下按，安装的位置要深一些且尽量水平不能装歪。

　　2.3.2 转轴上部的两个0型圈的检查

　　取下此两个0型圈。如图四所示，用手轻轻拉紧0型圈，看其是否出现裂纹和其磨损程度。若磨损严重或老化出现裂纹，及时更换此两个O型圈。

　　2.3.3 限位器和轴上其他O型圈的检查

　　限位器的作用是为防止帽的脱落，每6-12个月要更换一个新的限位器。将轴插入隔板之前要在0型圈和轴上涂抹少量的真空脂，同时插入时不要过分用力，避免0型圈损伤或断裂

　　2.3.4 检查隔板上样品通过的路径是否被堵塞使用后，隔板洗洁效果不彻底时，有可能会造成样品流经的部分路径堵塞，因此，每次使用完毕，须将隔板仔细冲洗十净还有若将加样头装在转头上，没有加人溶液并长时间旋转.会造成加样头发热和红垫圈异常磨损，及加样头产生振动噪音，因此，装上加样头旋转三分钟以上没有加入溶液时，要马上取下加样头散热并要冷却后再次使用。

　　4 装配相和其他部件的检查

　　还要检查装配帽按钮上下活动是否灵活，转头密封圈是否老化，密封圈的安装是否正确且在转头的螺纹处要涂润滑脂，转头盖是否旋紧(到位)等。特别应注意的是转头上安装了密封圈后不要倒着放置来进行储放和晾干，因为倘若放置表面不平时，极易使密封圈变形。