血细胞计数板的便用

　　(1)稀释菌液：根据待测菌悬液浓度,加无菌水适当稀释,目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4~5个酵母细胞为宜,一般稀释100倍即可。

　　(2)准备计数板：取清洁干燥的血细胞计数板(使用前可通过显微镜检验计数板上有无污物,若有,则需清洗后才能进行计数),在中央的计数室上加盖专用的盖玻片。 (3)加样：将稀释后的酵母菌悬液摇匀,用滴管吸取一滴置于盖玻片的边缘(不宜过多),让菌悬液沿缝隙靠毛细渗透作用缓缓渗入计数室,勿使气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。 也可以将菌悬液直接滴加在计数区上,不要使计数区两边平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻片后,造成计数区深度的升高。然后加盖盖玻片(勿使气泡产生)。

　　(4)计数：静置片刻(一般为5~10min ,使酵母菌全部沉降到血细胞计数室内。将血细胞计数板置于载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数室后,再换成高倍镜观察并计数。 由于活细胞在显微镜下是透明的,光照强度过大时难以辨别,所以观察时应减弱光照的强度。