醋酸膜蛋白电泳仪：血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳

　　一、实验目的

　　1、学习电泳技术的基本原理和醋酸纤维素薄膜电泳的操作技术。

　　2、掌握电泳分离血清蛋白及其定性分析方法。

　　二、实验原理

　　电泳：指带电颗粒在电场作用下，向与其自身所带电荷电性相反的电极移动的现象。

　　例如，蛋白质具有两性解离性质，当蛋白质溶液的大于等电点时，该蛋白质带负电荷，在电场中向正极移动；反之则带正电荷，在电场中向负极移动；只有蛋白质溶液pH 在蛋白质的等电点时静电荷为零，在电场中不向任何一极移动。

　　早在1890年就发现了电泳现象。1937年瑞典科学家Tiselius 设计了世界上第一台自由电泳仪，建立了“移界电泳法”，成功地将血清蛋白分成清蛋白、α1球蛋白、 α2球蛋白、 β球蛋白和γ球蛋白五个主要成分，为人们了解血清奠定了基础。为此获得1948年诺贝尔奖。

　　迁移率（泳动度）是指带电颗粒在单位电场强度下泳动的速度。

　　u=v /E=d /t dl=(cm 2?V -1?s -1) V /l Vt

　　u ：迁移率；

　　v ：质点泳动速度（cm 2·s -1）；

　　E ：电场强度（V ·cm -1）；

　　d ：质点泳动距离（cm ）；

　　l ：支持物有效长度（cm ）；

　　V ：支持物两端实际电压（V ）；

　　t ：通电时间（s ）

　　影响质点泳动速度的因素：

　　①颗粒表面电荷数↑；

　　②质点的分子量↓；

　　③颗粒大小及分子构象↓；

　　④介质黏度↓；

　　⑤电场强度↑；

　　⑥介质溶液的pH （距pI 大小）；

　　⑦溶液的离子强度↓；

　　⑧电渗现象：液体在电场中对于一个固体支持物的相对移动，是由于电泳支持物本身带有带点解离基团所致。例如在纸电泳中，由于滤纸上吸附OH -离子带负电荷，而与纸相接触的水溶液由于静电感应而带正电荷，液体便向负极移动，并携带颗粒同时移动，所以电泳时，颗粒泳动的表面速度是颗粒本身的泳动速度与由于电渗携带颗粒的移动速度之矢量和。

　　电泳种类：

　　按分离原理可分为区带电泳、移界电泳、等速电泳和聚焦电泳四种。

　　按有无固体支持物分类，可分为自由电泳和支持物电泳两大类：