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  • 醋酸膜蛋白电泳仪:血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳

    文/ 发布于2017-12-08 浏览次数:604

      一、实验目的

      1.掌握电泳法分离血清蛋白质的原理。

      2. 掌握血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的操作方法。

      3.测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。

      二、实验原理

      带电粒子在电场中向与其电性相反的电极方向泳动的现象称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点在pH4.0~7.3之间,在pH8.6的缓冲溶液中均带负电荷,在电场中向正极泳动。血清中各种蛋白质的等电点不同,所以带电荷量也不同。此外各种蛋白质的分子大小各有差异,因此在同一电场中泳动的速度不同。分子小而带电荷多者,泳动较快;反之,则较慢。

      采用醋酸纤维素薄膜为支持物的电泳方法,称为醋酸纤维素薄膜电泳。该膜具有均一的泡沫状结构(厚约120μm),渗透性强,对分子移动的阻力很弱。用其作支持物进行电泳,具有微量、快速、简便、分离清晰、对样品无吸附现象等优点。现已广泛用于血清蛋白、糖蛋白、脂蛋白、血红蛋白、酶的分离和免疫电泳等方面。

      经醋酸纤维素薄膜电泳可将血清蛋白按电泳速度分为5条区带,从正极端依次为清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白及γ球蛋白,经染色可计算出各蛋白质的百分含量。

      三、实验器材

      1. 电泳仪:为电泳提供直流电源。

      2. 电泳槽:为电泳提供场所。多用有机玻璃制成,电极用铂丝。

      3. 血清加样器 :可用盖玻片或X胶片或微量加样器。

      4. 醋酸纤维素薄膜:2cm×8cm

      5. 其它: 培养皿(直径9-10cm)、滤纸、玻璃板、镊子等。

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