SHIMADZUGC-14C气相色谱仪应用

　　SHIMADZUGC-14C气相色谱仪,产品信息通过标准配置的流量控制盒，GC-14C即可满足对两条填充柱气路和一条毛细管柱气路的同时控制。另外，用户也可根据需要增加相应的流量控制盒完成复杂样品分析。GC-14C高性能的大柱温箱设计允许最高使用温度可达到420℃，适合高沸点样品的分析。宽大的柱温箱设计使GC-14C可同时安装和使用填充柱和毛细管柱，便于柱的更换操作。GC-14C灵活多样的进样系统和检测器系统，满足对多功能、多任务的追求，使其可同时安装4个进样口、4个检测器，各单元可独立控温。功能丰富的Clarity工作站可对GC-14C主机进行反控。全中文化的操作界面、形象直观的快捷图标、丰富的定性定量功能、灵活的报告制作功能令数据处理更为简便。

　　SHIMADZUGC-14C气相色谱仪

　　川芎为伞形科植物LigusticumChuanxiongHort.的干燥根茎。川芎油为川芎药材经超临界CO2流体萃取制得，主要含有苯酞内酯类、阿魏酸、川芎嗪等成分[1～3]，在国内许多药物研究单位已将其作为研发新药的原料。为了控制其质量，本实验以阿魏酸为定量指标，采用GC内标法对川芎油进行了含量测定。

　　1、仪器与试药

　　SHIMADZUGC-14C气相色谱仪;FID检测器;CLASS-GC10色谱工作站;HA-221-40-11-C型超临界萃取装置(江苏南通华安公司生产)。

　　对照品：阿魏酸(批号0733-9910，中国药品生物制品检定所提供，含量测定用)，香荆芥酚(美国Sigma公司提供)，归一法测定含量为99%，其它试剂均为分析纯。

　　川芎药材分别购自蕲春药材市场，北京同仁堂，桂林腾龙堂，上海童涵春堂，新乡佐今明大药房，临沂仁和堂，杭州大红鹰宝丰医药公司，经湖北中医学院鉴定教研室吴和珍博士鉴定均为伞形科植物LigusticumchuanxiongHort.的干燥根茎。

　　川芎油：自制(称取川芎饮片300g，粉碎，过20目筛，置超临界CO2萃取装置中萃取，萃取温度50℃，萃取压力35MPa，萃取时间2h，分离温度40℃，压力5.5MPa，CO2流量为20L·h-1。提取物经乙醚萃取，无水硫酸钠脱水后挥去溶剂，得澄明的棕黄色川芎油)。

　　2、方法与结果

　　2.1色谱条件色谱柱为DB-17石英毛细管柱(30mm×0.25mm，0.25μm);载气为氮气，分流比20∶1;柱前压100kpa;柱温为起始温度80℃，以5℃·min-1速率升至210℃;气化温度240℃;检测器温度240℃;进样量1μl。

　　2.2对照品溶液和内标物溶液的制备

　　2.2.1对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品210mg，以醋酸乙酯定容至25ml量瓶中，制得浓度为8.04mg·ml-1对照品贮备液。

　　2.2.2内标物溶液的制备精密称取香荆芥酚221.2mg，以醋酸乙酯定容至50ml量瓶中，制得浓度为4.424mg·ml-1的内标物溶液。

　　2.3方法学考察

　　2.3.1标准曲线的制备分别精密吸取阿魏酸对照品贮备液0.5，1，2，4，8ml置10ml量瓶中，各精密加入内标物溶液1ml，醋酸乙酯定容至刻度，摇匀。分别吸取1μl，注入气相色谱仪，按色谱条件进行测定，以对照品浓度为横坐标，对照品与内标物峰面积比值为纵坐标，绘制标准曲线，进行回归分析，得回归方程Y=1.0675X-0.

　　3543，r=0.

　　9996，表明阿魏酸在0.402～6.432mg·ml-1范围内具有良好线性关系。

　　2.3.2校正因子的测定取阿魏酸对照品约8，10，12mg(相当于80%，100%，120%)，精密称定，置10ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml,醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，取1μl，注入气相色谱仪，连续进样3次，按平均峰面积计算校正因子，结果3种不同浓度的溶液所测校正因子的平均值为1.

　　9151，RSD=0.84%。

　　2.3.3精密度实验取0.804mg·ml-1含内标物的对照品溶液，重复进样6次，结果RSD=1.47%，表明精密度良好。

　　2.3.4重现性实验取同一批供试品溶液6份，按供试品测定方法测定，计算阿魏酸含量，结果RSD=1.21%，表明重现性良好。

　　2.3.5稳定性实验取上述供试品溶液，分别于0，2，4，6，8，10，12，24h进样，依法测定，结果RSD=1.49%，表明供试品溶液在24h内稳定性良好。

　　2.3.6加样回收率实验分别精密称取已测定含量的同一批川芎油6份，各约0.25g，加入阿魏酸对照品适量，精密加入内标物溶液0.5ml于5ml量瓶中，醋酸乙酯定容至刻度，摇匀。分别吸取1μl注入气相色谱仪中，记录色谱，结果阿魏酸平均加样回收率为101.5%，RSD=1.66%。

　　2.3.7样品的测定称取川芎油约0.5g置于5ml棕色量瓶中，精密加入内标物溶液0.5ml，醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，吸取1μl注入气相色谱仪，以内标法计算阿魏酸含量。(香荆芥酚TR=19.91min，阿魏酸TR=22.39min)

　　3、讨论

　　由于GC法进样量少，采用内标法可减少进样误差。本文采用GC法对川芎油中阿魏酸含量进行了测定。结果表明，本方法简便、准确、重现性好，可为川芎油及其制剂的质量控制方法提供参考。

　　实验中曾分别对麝香草酚、香荆芥酚、苯甲酸、对羟基苯甲酸乙酯作为内标物进行选择，结果香荆芥酚不与川芎油中其它峰重叠，并与阿魏酸完全分离。

　　实验中曾对DB-1，ZB-5和DB-WAX色谱柱进行了试验比较，结果以DB-17色谱柱分析效果好。