1.接好电源线并确认与有接地保护的电源插座相连。
2.按颜色接好电泳槽与电泳仪的连接导线,并装入电泳样品。
3.确认电源符合要求后,开启仪器的“电源开关”。此时“液晶显示屏”显示:欢迎使用DYY-8C 型电泳仪,同时仪器蜂鸣4 声,然后显示上一次工作的设定值。对于每次重复同一参数使用时,即可直接选择Start 后启动输出。
4.如要改变其数值可按上下键,每按一次改变一个数字量;如希望快速改变可按住按键不放松,则数值会连续快速改变,当到达所需数值时松开即可。
5.如希望查看并设定电压、电流和定时时间,可以按[选择]键,此时箭头指示相应位置。同时,其数值由上下调节按键控制。设定定时时间的范围为: 1 分-99小时59 分。
6.按[启/停]键后,仪器蜂鸣4 声,输出启动,“输出指示灯”闪亮,当输出稳定时后,稳压/稳流状态由U、I 是否闪烁表示。在稳压/稳流状态改变时,仪器会自动鸣响2 声以示提醒用户。仪器正常输出后,设定值Us、Is、Ts 自动变为实际值U、I、T。
7.如果没有达到预想的稳定值,可以如下操作:(1)检查电泳样品的配置是否正常。(2)调节相应电压电流的设定值。
8.选择设置Us、Is、Ts 后,在8 秒钟内不按任何键,则自动返回显示实际值U、I、T。
9.在仪器正常输出时若要停机,可按[启/停]键,输出立刻关闭并显示“stop”同时反复鸣响,按[选择]键则停止鸣响。要继续,选择“go on”,重新开始选择“start”。
DYCZ-24F 型电泳槽使用说明书
注意:电泳前,禁止将电泳槽附带的电源导线连接到电泳仪电源上。
1.将接触胶面的二块玻璃板用纱布沾着酒精顺着一个方向擦,然后晾干,再将清洗干净的凝胶玻璃放入制胶架上,凹槽玻璃冲外。
2.使制胶槽面板上的密封条平整,合上制胶槽面板,用四个转向夹子夹紧固定。
3.灌分离胶至上沿约2-3 厘米处。
4.立即加约1cm 的蒸馏水压上(约2.5 毫升蒸馏水),以隔氧和去气泡。
5.灌浓缩胶(1mm 厚的胶约7mL,1.5mm 厚的胶约10mL),注意:先用滤纸吸去覆盖水,再灌胶。
6.立即插入式样格。
7.待胶凝固后,松开转向夹子,取出玻璃胶室。
8.装夹玻璃胶室:在本体两侧装入玻璃胶室,注意使两凹口相对。插入斜插板并夹紧(注意使斜插板的大平面与玻璃接触)。
9.若只跑一块胶,将一侧不跑胶的平凹玻璃互换,其余向上。
10.先在上槽内加入缓冲液150 毫升左右。
11.然后再在下槽内加入缓冲液,最多可加至上槽黑色密封条处(即最多可加缓冲液3200 毫升)。
12.拔掉试样格。
13.将要测定的样品进行蛋白质浓度的标化。
①在样品和缓冲液煮之前,要对每一个样品的蛋白质浓度稀释或浓缩为1mg/ml。
②蛋白染料:没和蛋白结合前,染料呈黄褐色,和蛋白结合后,呈蓝色,蛋白浓度越高,染料颜色越蓝。
③称1mg 标准蛋白溶在1ml 水中,制成1mg/ml 标准蛋白溶液。
14.样品和mark 按着1:1 的体积配样品缓冲液,放在100 度的沸水中煮三分钟,注意离心管或扎个眼或用封口膜紧紧缠绕几圈,防止住崩裂了。
15.加样品。
16.连接外部恒温循环器,(严禁直接连到自来水管上)
17.电泳:盖上盖子,接通电泳仪电源,选择适宜的电泳参数进行电泳,
18.结束电泳:待电泳的指示剂跑到槽的底部后,停止电泳。先关闭电泳仪电源,然后拔掉电源导线,切断循环冷却水,松开斜插板,放掉上槽缓冲液,取出玻璃胶室,用很薄的刀片轻轻的插进凹槽玻璃的顶部与另一块玻璃之间的缝隙,用薄刀片轻轻向上撬,将上层玻璃轻轻撬开。
19.染色:将有胶板的玻璃板平放在桌上,用刀片从两侧沿着玻璃条划开。
20.脱色:将染色后的胶片放到脱色液中脱色,开始时,多换几次脱色液,以后可以多放脱色液过夜,可用脱色摇床过夜脱色,直至胶片背景蓝色成完全透明状,即可看到清晰的分离条带。