紫外可见分光光度计工作原理
利用物质的吸收光谱来鉴别物质及确定其含量的仪器称为分光光度计。72型分光光度计是可见分光光度计,可测定的波长范围为420-760nm,它由三大部分构成,磁饱和稳压电源和光源、单色器和测光机构-微电量计。
1)光源;光源是10v、
7.5A的钨丝灯泡,装在单色器外能通风冷却的金属盒内,其电源由磁饱和稳压电源供给,在分光光度测定中,电源要求很稳定。
2)单色器;单色器可将混合光分解为单一波长的光,它是72型分光光度计的主要部件,由一个光学玻璃棱镜和两个透镜组成。自光源发出的光,经过透镜成平行光进入棱镜,经棱镜分解成各种不同波长的单色光,被镀铝的反射镜反射进入另一透镜,聚集于出光狭缝,反射镜及另一透镜装在转盘上,转盘转动的角度由波长调节器上的阿基米德螺线凸轮传动,调节器上有刻有波长的刻度标尺,转动波长调节器,就可以在出光狭缝的后面得到任一所需的单色光。
3)测光机构;单色光通过盛待测溶液的比色皿再射入到硒光电池上,溶液的浓度和液层的厚度与透光强度有关,硒光电池根据透过的光强产生相应的光电流,由检流计测出光电流的大小,硒光电池前的光亮调节器可调节光能量,微电计上分别标有透光率和光密度,72型分光光度计是根据相对测量原理而工作的。
紫外可见分光光度计使用方法
1)接好线路后,先检查各开关是否在“关”处,光路闸门放在黑点处,再将电源插头插入220V交流电源上,打开电源开关和光源开关,将光路闸门放在红点处。
2)取出比色皿,将其中一只装空白溶液,其余三只装待测溶液,放在定位盒内,盖上暗箱盖,装溶液前比色皿用蒸馏水洗净,并用溶液荡洗数次后,再盛至体积,池外应赶紧,若有水滴,应用镜头纸吸干,取用时用手捏住比色皿的毛玻璃面。
3)用波长调节器调到所需的波长,将空白溶液正对光路,调光量调节器,使检流计上光点准线对准透光率为100的位置,拉动拉杆,使待测溶液进入光路,读取微电计标尺上的透光率,测定完毕,及时关闭光路闸门,检查电计的零点位置,保护硒光电池。
4)紫外可见分光光度计应安放在清洁、干燥、无腐蚀气体和较暗的室内,仪器使用完毕后应擦拭干净,各开关关闭,紫外可见分光光度计连续使用时间不应超过4h。