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  • 红色荧光核酸染料使用方法

    文/ 发布于2017-11-20 浏览次数:747

      红色荧光核酸染料是一种高度灵敏的荧光染色剂,常用于琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳后核酸染色。该染料与 DNA结合后在紫外光透射仪激发下放射出橙红色荧光,可用 Polaroid 底片或带 CCD 成像头的凝胶成像处理系统拍摄。结合 DNA 染料的复合物荧光产率比没有结合 DNA 的染料高出 20-30 倍,所以当凝胶中含有游离的红色荧光核酸染料(0.5ug/ml)时,可以检测到少至 10ng 的 DNA 条带。

      使用方法:

      1、胶染:将 100ml 琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为 0.8%~2%)放入微波炉中融化,冷却至 60℃左右(不烫手时)后加入 5-10ul 染料,轻轻摇匀后倒胶(避免产生气泡),待胶完全凝固后上样电泳,电泳完毕在紫光灯下观察拍照

      (注:由于在该染料存在的情况下,线状 DNA 的电泳迁移率约降低 15%)。

      2、泡染:琼脂糖凝胶电泳后,将胶浸没在含有染料(0.5ug/ml)的电泳缓冲液或去离子水中,室温下染色 15-45min(取决于凝胶厚度)。脱色时用去离子水或者 1mM 的 MgSO4 溶液室温浸泡约 10-30min 可降低背景荧光(可选)。

      注意事项:

      1,本品为强烈的诱变剂,使用时请注意安全。

      2, 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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