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反转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction RT-PCR)是一项有效的和广泛使用的研究工具,它可以用于多种应用,包括RNA检测、基因定量以及克隆。
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在PCR 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR 进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法 。
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转移1 pg~100 ng的poly(A)+RNA或者10 pg~1
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cDNA产量的很低
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Abstract:迄今为止,已确定9禽流感病毒神经氨酸酶(NA)的亚型。为了能更迅速的区分禽流感病毒的NA,对其进行了RT-PCR。在分析了GenBank509个完整的NA序列的基础上,设计了九对NA RT-PCR的特异引物。设计的引物能扩增部分NA的基因,并且对于每一个NA的亚型(N1—N9)是独一无二的。
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RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。
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基因表达的检测有几种方法。经典的方法(仍然重要)是根据在细胞或生物体中 所观察到的生物化学或表型的变化来决定某一特定基因是否表达。随着大分子分离技 术的进步使得特异的基因产物或蛋白分子的识别和分离成为可能。
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RT-PCR是将RNA反转录(RT)和以反转录产物cDNA为模板的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的DNA片段。
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艾德莱PCR相关产品是通过全基因合成和点突变改造基因,筛选高活性的克隆进行表达;利用亲和层析、离子交换层析采用医药级生产设备纯化而成。具有扩增能力强,扩增特异性高的特点。适用于各种不同要求的PCR...
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做过PCR的童鞋们都知道要想完全hold该实验、成为真正的PCR达人,并非易事。就qPCR而言,似乎其中的每一环节都可以让整个实验挂掉,也因此成为了资深科研狗们心中的痛。有时,各种假阳性、非特异性...
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做过PCR的童鞋们都知道要想完全hold该实验、成为真正的PCR达人,并非易事。就qPCR而言,似乎其中的每一环节都可以让整个实验挂掉,也因此成为了资深科研狗们心中的痛。今天小编就整理了一些有关q...
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一、Real-time qPCR发展史 Real-time qPCR就是在PCR扩增过程中,通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct 值和该模板的起始拷贝数...