固相萃取与高效液相色谱的比较

　　固相萃取的前身就是柱层析技术。然而，人们在实践中发现，如果一篇文献中所提到的样品前处理采用的是柱层析的方法，要重复文献所提及的实验往往是十分困难的。其主要原因之一就是实验室自行装填的层析柱填料来源不一，装填的密度不一。当然，得到的结果也就不同。这也是阻碍柱层析技术广泛应用的一个主要原因。

　　固相萃取技术的发展在很大程度上是得益于高效液相色谱(HPLC)填料技术的发展，因此，固相萃取技术与高效液相色谱技术有许多相同之处。例如，两者都是通过液体中的目标化合物在固体填料上进行的吸附及脱附达到分离的目的。因此，人们常常可以通过目标化合物在HPLC的行为来预测其在SPE柱上的行为，并以此作为建立固相萃取方法的基础。

　　但是，两者之间还是有许多不同之处。首先，两者的目的是不同的。在分析型HPLC中，人们追求的是在尽可能短的时间里将混合物中的组分分离开。相邻的两个组分峰最好能够达到基线分离，也就是达到分离度a≥1．2。同时，要求色谱柱的柱效要高，以便得到尖锐的、符合高斯分布的色谱峰。这样无论是对组分进行定性分析，还是定量分析的准确性都高。然而，在固相萃取中，人们关心的是将目标化合物从复杂的样品基质中分离出来；将干扰分析、对分析仪器造成伤害的杂质尽可能地除去；将目标化合物浓缩到适当的浓度，以便分析仪器能够有效地进行定性、定量分析。

　　在分析型HPLC中，人们在不断追求具有更好分辨率、更高塔板数的色谱柱。其中最有代表性的就是Waters公司2004年推出市场的超高压液相色谱(UPLC)。其色谱柱填料颗粒一般都是规则球形的，直径从传统的5μm减少至1.7μm，色谱柱压力从传统的<41．37MPa增加到>103．42 MPa。但SPE所使用的填料通常是不规则的，颗粒也比HPLC填料大很多，直径在40～50μm。经典的SPE柱的塔板数大多小于50。在HPLC中，样品进入色谱柱后首先在柱头聚集，随着流动相连续不断地进人，化合物在色谱柱上连续不断地在固相与液相之间分配以达到分离的目的，这个过程直到化合物流出色谱柱才停止。而化合物在SPE柱上的行为则不同，样品基质就是流动相。

　　由于SPE柱的填料高度一般都很短，化合物在SPE柱上几乎没有分离，要么被吸附，要么随基质流过。因此，固相萃取是无法分别将混合物中的各组分分离开的。但在某种条件下，固相萃取可以将不同类别的混合物分离。例如，利用混合型固相萃取柱将弱酸性药物与弱碱性药物同时吸附，并用不同溶剂分别洗脱。