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  • ATP荧光检测仪原理及应用

    文/ 发布于2017-12-08 浏览次数:1298

      1.ATP 荧光检测原理 --生物荧光

      ATP(Adenosine Triphosphate,三磷酸腺苷)是各种生命活动能量的直接来源,存在于所有活的动植物细胞、细菌和食物残渣中。ATP 荧光检测法是根据萤火虫发光原理开发的快速检测技术。即有氧条件下,虫荧光素酶催化虫荧光素和 ATP 之间发生氧化反应形成氧化荧光素并发出荧光,其强度与微生物数量呈比例关系。

      荧光检测作用机理如下:

      ATP 快速检测卫生监控系统(以下统称为 ATP 荧光检测仪)即是通过检测荧光信号的强度从而得知待测目标被细菌、食物残渣等污染的程度,因此 ATP 的检测可以作为判断是否洁净的指标。

      与其它评估方法相比,ATP 快速监控具有以下明显优势:

      1). 实时监控:荧光素酶/荧光素/ATP 反应为即时反应,读数可以在数秒之内得到。因此可根据结果立即采取纠正措施。

      2). 良好的可靠性和一致性:ATP 荧光检测仪可以确定出各种有机物和/ 或微生物残渣的存在。另外由于它使用独有的液体稳定试剂,因而检测结果准确、重复性好,为真实的洁净程序评估提供了可靠依据。

      3). 直接和间接危险性评估:ATP 检测的是表面已有的生物物质和有生物 残留物、易滋生微生物的潜在危险区域。食物残留区域是最易受到微生物污染或 最易发生交叉污染的地方。

      4). 使用简便:非专业技术人员也可轻松使用 ATP 荧光检测仪、拭子和软件,这使得日常使用趋于简单化。

      5). 结果易于判读:标本检测结果以相对发光单位(RLU)来显示,它代表了污染物产生的光总量。检测结果可以直接与通过(Pass)/不通过(Fail)数值进行 比较,通过则屏幕上显示为对号(√);略微超出期望值的则显示警告符号(!), 即介于通过和不通过之间的数值;结果超出最高限量值则显示叉号(×)。RLU读数越小表示表面越洁净。

      2.ATP 荧光检测仪应用进展

      ATP 生物发光技术产生于20 世纪70年代中期。1983 年,Moyer等最早 提出细胞内源性ATP的含量可以反映细胞的活性和活细胞的数量。同年 Gronroos等也证实该技术是一种可靠、灵敏度高的确定细胞活性度的检测方法。20 世纪 80 年代,英国人首先研制出ATP检测仪检测系统,随后发展到欧洲、 美国和日本。应用范围涉及食品加工、超市和饮食行业,检测内容包括微生物和 食品残渣。1998 年,日本国会颁布了《关于食品制造过程管理高度化临时措施法》,其中即包含了应用 ATP 检测仪检测系统的内容。1999 年,日本还成立了 ATP 涂抹检查研究会,专门研究该方法的使用效率和应用领域,其内容之一就是在食品卫生监测领域中,解决现场微生物的检测问题。20 世纪末,一些 ATP检测仪检测系统及技术被引进我国,到目前为止,除个别省级卫生监督检测单位装备外,主要是在一些外资或合资企业中自行检测使用。2002 年,我国卫生部颁发了食品加工企业 HACCP 实施指南,鼓励食品加工企业引入ATP检测系统。 近年来,虫荧光素酶已通过基因工程生产,价格大幅度降低,而且 ATP 生物发 光法在检测食品微生物时简单、快速且灵敏度高, 随着相关仪器的小型化,ATP 生物发光技术必将会在国内相关行业得到迅速普及。

      2.ATP荧光检测仪的应用

      ATP荧光检测仪通过生物发光原理对液态样本中的菌落总数进行检测,其中芯片的设计可以同时满足6个样本的检测,试剂用量少,效率高,可以应用在食品安全和环境领域。

      4.ATP的主要来源

      ①微生物:细菌、酵母&霉菌;

      ②食品:水果、乳制品、蔬菜、肉类等;

      ③人员。

      5.ATP与微生物关系

      6.ATP荧光检测仪的特点

      ATP荧光检测仪具有快速、准确、灵敏、简便、可靠等优点,能迅速的获得检测结果。

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