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  • 什么是Q-PCR和RT PCR

    文/ 发布于2017-11-20 浏览次数:1852

      Q-PCR就是定量的PCR,这其中包含real-time PCR

      real-time PCR指的是用可以实时检测信号的机器来做PCR,最常用的是roche的light cycler和applied biosystems的机器,一般就是在PCR反应中加dye或者probe,每一个cycle都读一下荧光强度

      Q-PCR还可以用其他的方法做,大部分其实都算作semi-quantitative,比如用普通的PCR机器做,保证在PCR的反应的线性区域的时候停止反应,这个时候得到的DNA的量应该是比较能够定量的(也经常有人添加含反射性元素P32的dCTP到反应中,敏感度比一般的PCR高)

      至于RT PCR,就是指reverse transcription的PCR,就是从RNA得到cDNA以后进行的PCR,跟real time没有什么直接关系

      至于absolute,其实就是在做Q-PCR的时候做一个已知浓度的DNA/RNA/cDNA的standard curve,然后根据未知浓度的样品PCR的结果在这个strandard curve的位置来估计未知样品的浓度。


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