多细胞因子检测的新工具

　　Mosaic? ELISA是R&D systems推出的一种96孔微孔板，其中每孔含有多达8种抗体，能同时检测多种分析物。为计算样品浓度，Mosaic ELISA试剂盒中还包含了纯化的分析物标准品。

　　Mosaic ELISA也是采用了夹心法ELISA技术，但能同时检测细胞培养上清、血清或血浆样品中的最多8种分析物。板中每个孔预先包被了多个捕获抗体。将样本加入孔中，目标分析物与特异的捕获抗体结合。随后加入生物素检测抗体，辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素以及化学发光底物试剂，以生成分析物特异的信号，此信号与单个捕获抗体所结合的分析物数量成正比。平板可利用几种常用的化学发光成像系统来读取。

　　目前，R&D systems推出了两个试剂盒。Mosaic ELISA Human Cytokine Panel 1包含了特异识别CD40L、IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17和TNF-α的的抗体。Mosaic ELISA Human Growth Factor Panel 1则包含了bFGF、PDGF-BB、G-CSF、plGF、HGF和VEGF这六种生长因子的抗体。

　　Mosaic ELISA将常规的双位点夹心免疫法的特异性与多重分析物图谱分析的高通量性能相结合，成为一种极佳的替代方法，而无需开展多个传统的ELISA实验。

　　Mosaic ELISA 试剂盒的特点：

　　96孔板形式

　　每孔最多8个分析物

　　320个数据点

　　样本体积小

　　分析时间4.5小时

　　利用Mosaic ELISA Human Cytokine Panel同时检测多个分析物。按照规定次数用PHA处理人类外周血单核细胞（PBMC）。去除细胞培养上清等份，利用Mosaic ELISA Human Cytokine Panel 1同时定量8个不同的细胞因子水平。A. 孔示意图显示出可用Mosaic ELISA Human Cytokine Panel检测的分析物点的位置。参考点（RS）提供了强的阳性信号，可轻松观察到孔的位置，并在数据分析中用于点比对。B. 标准曲线中每孔以及PHA处理的PBMC上清的代表性图像。PBMC上清按1:64稀释，确保所有分析物的值落在标准曲线内。C. 通过分析每孔中IL-6点的平均点像素密度产生的IL-6直方数据图（B中圈出的）。