旋光仪工作原理和测定方法

　　旋光仪是指光学活性物质使偏振光的振动平面旋转的角度，旋光度的测定对于研究具有光学活性的分子的构型及确定某些反应机理具有重要的作用。在给定的实验条件下，将测得的旋光度通过换算，即可得知光学活性物质特征的物理常数，即比旋光度，后者对鉴定旋光性化合物是不可缺少的，并且可计算出旋光化合物的光学纯度。

　　旋光仪工作原理

　　从有机化学有关立体化学的学习中可得知，化合物可以分为两类：一类能使偏光振动平面旋转一定的角度，即有旋光性，称为旋光物质或光学活性物质，另一类则没有旋光性，旋光分子具有实物与其镜像不能重叠的特点，即手性，大多数生物碱和生物体内的大部分有机分子都是光学活性的。

　　定量测定溶液或液体旋光程度的仪器称为旋光仪，常用的旋光仪主要由光源、起偏镜、样品管和检偏镜几部分组成。光源为炽热的钠光灯，起偏镜是由两块光学透明的方解石粘合而成，也称尼克尔棱镜，其作用是使自然光通过后产生所需要的平面偏振光。尼克尔棱镜的作用就像一个栅栏。普通光是在所有平面振动的电磁波，通过棱镜时只有和棱镜晶轴平行的平面振动的光才能通过，这种只在一个平面振动的光叫平面偏振光。简称偏光。样品管装待测的旋光性液体或溶液，其长度有1dm和2dm等几种，对旋光度较小或溶液浓度较稀的样品，最好采用2dm长的样品管。当偏光通过盛有旋光性物质的样品管后，因物质的旋光性使偏光不能通过第二个棱镜，必须将检偏镜扭转一定角度后才能通过，因此要调节检偏镜进行配光，由装在检偏镜上的标尺盘上移动的角度，可指示出检偏镜转动角度，即为该物质在此浓度的旋光度，使偏振光平面向右旋转的旋光性物质叫右旋体，向左旋转的叫左旋体。

　　旋光仪测定方法

　　1）接通电源，5min后钠光灯发光正常，即可开始测定

　　2）校正仪器零点；即在旋光管未放进样品时和充满蒸馏水或待测样品的溶剂时，观察零度视场是否一致，如不一致说明零点有误差，应在测量读数中减去或加上这一偏差值

　　3）测试；根据需要选择长度适宜的样品管，充满待测液，旋好螺丝盖帽使不漏水，螺帽不宜过紧，过紧使玻盖引起应力，影响读数，将旋光管擦拭干净、放入旋光仪中，旋转粗调和微调旋钮，所得读数与零点之间的差值即为试样的旋光度，一般应测定几次，取其平均值为测定结果。测定时要准确称量0.1-0.5g样品，选择适当溶剂在容量瓶中配制溶液，如因样品单质溶液不清亮时需用滴定滤纸加以过滤。

　　4）计算比旋光度；测得旋光度并换算为比旋光度后，求出样品的光学纯度。光学纯度的定义是：旋光性产物的比旋光度除以光学纯试样在相同条件下的比旋光度。