缓冲液的pH值由哪些因素决定？

　　设缓冲系统的弱酸的电离常数为K（平衡常数），平衡时弱酸的浓度为[酸]，弱酸盐的浓度为[盐]，则由弱酸的电离平衡式可得下式：

　　根据此式可得出下列几点结论：

　　（1）缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数K及盐和酸的浓度有关。弱酸一定，但酸和盐的比例不同时，可以得到不同的pH值。当酸和盐浓度相等时，溶液的pH值与PK值相同。

　　（2）酸和盐浓度等比例也增减时，溶液的pH值不便。

　　（3）酸和盐浓度相等时，缓冲液的缓冲效率为最高，比例相差越大，缓冲效率越低，一般地说缓冲液有效缓冲范围为PK±1pH。

　　从上述可知，只要知道缓冲对的PK值，和要配制的缓冲液的pH值（及要求的缓冲液总浓度）时，可按公式计算出[盐]和[酸]的量。这样算涉及到对数的换算，较麻烦，前人为减少后人的计算麻烦，经计算已为我们总结出pH值与缓冲液对离子用量的关系列出了表格。讲义附录部分节录有磷酸缓冲液的配制表。只要我们知道要配制的缓冲液的pH，经查表便可计算处所用缓冲剂的比例和用量。例如配制500nmpH5.8浓度为0.1M磷酸缓冲液。

　　经查表知pH5.8浓度为0.2M Na2HPO48.0毫升，而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推论出配制100ml0.1M的磷酸缓冲液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。

　　所以500ml 0.1M磷酸缓冲液需要Na2HPO4量为:

　　需Na2HPO4量为 :

　　计算好后，按计算结果称好药品，放于烧杯中，加少量蒸馏水溶解，转移入50ml容量瓶，加蒸馏水至刻度，摇匀，便得所需的缓冲液。

　　各种缓冲溶液的配制，均按下表按比例混合，某些试剂，必须标定配成准确的浓度才能进行，如醋酸、NaOH等。

　　（2）磷酸盐缓冲液的配制

　　1/15M的Na2HPO4溶液（11.876克纯的Na2HPO4·2H2O溶于1升蒸馏水中）及1/15M的KH2PO4溶液（将9.078克KH2PO4溶于1升水中）将着两种溶液依不同比例混合。

　　(3)Tris缓冲溶液

　　贮备液

　　溶液A：0.2M Tris（三羟甲基氨基甲烷）

　　溶液B：0.2M HCl

　　50mlA＋XmlB，用蒸馏水稀释到200ml

　　（4）磷酸盐－柠檬酸缓冲液的配制

　　0.2M Na2HPO4·2H2O溶液及0.1M柠檬酸溶液，并依不同比例混合

　　(5)盐缓冲液的配制

　　a、M/20硼砂（10.108克Na2B4O7·10H2O溶在一升水中）

　　b、M/5硼酸＋M/20NaCl（12.45克H2BO＋2.925克）NaCl在一升水中

　　(五)药品规格及其应用范围

　　根据药品纯度不同一般可分为下列几类：

　　（1）保证试剂 （G、R）用在科学研究及微量分析方面

　　（2）分析试剂 （A、R）定量分析时标定溶液用

　　（3）化学纯试剂（C、P）定性试验时用

　　（4）实验试剂 （L、R）用于和实验结果关系不大的场合

　　（5）工业品 用于大型或工业生产上

　　在实验中用的最多的是C、P一类，A、R使用较少，G、R非有特殊需要时，一般尽量用A、R来代替，因为纯度高，价格很贵。

　　除上述几种规格外尚有几种不以纯度分类的规格：

　　（1）生物试剂 （B、R）生物体中提炼出来，成分含量相差较大，如培养微生物时用牛肉膏，酵母膏等药品即属此类。

　　（2）指示剂（Ind）配制指示剂用

　　（3）层析纯，色层分析时采用

　　（4）生物染色剂BS如甲基兰

　　（6）常用标准溶液的配制与标定

　　(1)0.1mol/L NaOH溶液