磷酸盐缓冲液的配制方法及各种PH值的磷酸盐缓冲液的配制

       磷酸盐缓冲液是我们在化学研究中一个常用的缓冲溶液，磷酸盐缓冲液英文缩写为PBS，指的是磷酸盐缓冲溶液、磷酸盐缓冲盐水及磷酸盐缓冲钠。那么磷酸盐缓冲液如何配制，各种PH值的磷酸盐缓冲液的配制方法又是什么呢，下面跟随小编一起来看一下。

　　磷酸盐缓冲液的配制方法：

　　试剂：NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O

　　配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。

　　（1）0.2mol/L的Na2HPO4；称取NaH2PO4.2H2O 31.2g(或NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

　　（2）0.2mol/L的Na2HPO4：称取Na2HPO4.12H2O 71.632g（或Na2HPO4·7H2O 53.6g或Na2HPO4·2H2O 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。

　　（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。

　　0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.0）

　　pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml)0.2mol/L Na2HPO4(ml)

　　5.7 93.5 6.5

　　5.8 92.0 8.0

　　5.9 90.0 10.0

　　6.0 87.7 12.3

　　6.1 85.0 15.0

　　6.2 81.5 18.5

　　6.3 77.5 22.5

　　6.4 73.5 26.5

　　6.5 68.5 31.5

　　6.6 62.5 37.5

　　6.7 56.5 43.5

　　6.8 51.0 49.0

　　6.9 45.0 55.0

　　7.0 39.0 61.0

　　7.1 33.0 67.0

　　7.2 28.0 72.0

　　7.3 23.0 67.0

　　7.4 19.0 81.0

　　7.5 16.0 84.0

　　7.6 13.0 87.0

　　7.7 10.5 89.5

　　7.8 8.5 91.5

　　7.9 7.0 93.0

　　8.0 5.3 94.7

　　各种PH值的磷酸盐缓冲液的配制

　　磷酸盐缓冲液

　　取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。

　　磷酸盐缓冲液(pH2.0)

　　甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。

　　磷酸盐缓冲液(pH2.5)

　　取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。

　　磷酸盐缓冲液(pH5.0)

　　取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。

　　磷酸盐缓冲液(pH5.8)

　　取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。

　　磷酸盐缓冲液(pH6.5)

　　取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。

　　磷酸盐缓冲液(pH6.6)

　　取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。

　　磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8)

　　取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。

　　磷酸盐缓冲液(pH6.8)

　　取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。

　　磷酸盐缓冲液(pH7.0)

　　取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml，用水稀释至100ml，即得。

　　磷酸盐缓冲液(pH7.2)

　　取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml，加新沸过的冷水稀释至200ml，摇匀，即得。磷酸盐缓冲液(pH7.3)

　　取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml，调节pH值至7.3，即得。

　　磷酸盐缓冲液(pH7.4)

　　取磷酸二氢钾1.36g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml，用水稀释至200ml，即得。

       磷酸盐缓冲液(pH7.6)

　　取磷酸二氢钾27.22g，加水使溶解成1000ml，取50ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml，再加水稀释至200ml，即得。

　　磷酸盐缓冲液(pH7.8)

　　甲液：取磷酸氢二钠35.9g，加水溶解，并稀释至500ml。

　　乙液：取磷酸二氢钠2.76g，加水溶解，并稀释至100ml。取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合，摇匀，即得。

　　磷酸盐缓冲液(pH7.8～8.0)

取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g，加水使溶解成1000ml，即得。

磷酸盐缓冲液的用途

主要用于一些化学实验中不影响实验反应的情况下调节pH值，以便让实验的化学反应在最佳条件下进行。部分用于食品或是饲料行业加工，如食品或者饲料真菌毒素检验中Elisa方法的洗板应用或者食品微生物检验中的稀释缓冲液。

　　缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。根据经验来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变，在经过昼夜的时间后，PH值会明显改变。所以做实验的同学可要注意了，PH值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS，如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液。