细胞样品采集、冻存技术操作指南

　　科学家研发出LiveCyte新型细胞冻存技术，能有效地提高常规肿瘤细胞复苏后存活率与活力。技术质量稳定可靠，使用方便，助力科研工作者摆脱程序繁琐、操作复杂、容易污染的传统冻存方法，专注于后续实验研究。

　　LiveCyte即用型细胞冻存技术，所含化学成分明确，无动物源性成分，可一步实现细胞冻存并长期在-80℃冰箱保存，保护细胞免受冰 晶和溶质损伤，适用于大多数常规细胞。

　　技术优点

　　1、省去繁琐的降温步骤，可直接放置于-80°C 冰箱，节省时间和精力。

　　2、即用型，无需现配，操作方便，可减少实验中因操作引起的污染。

　　3、在多种哺乳细胞系中经过性能验证，其复苏率和活率达90%以上。

　　4、可长期存储于-80°C 冰箱（2年以上），取用方便。

　　具体操作步骤

　　1、培养皿或培养瓶中细胞按常规方法消化，或分离获得原代细胞后，收集于离心管中。

　　2、使用离心机离心，去除上清，收集细胞沉淀。

　　3、根据细胞生长密度加入适量的细胞冻存液进行重悬，充分混匀（推荐冻存密度为 1-2x10的6/ml）。

　　4、将细胞悬液分装至冻存管中，直接放置于-80°C 冰箱保存。24 小时后可移入液氮长期保存（可选）。

　　细胞复苏流程

　　1、从-80°C 冰箱或液氮罐中取出细胞。

　　2、迅速放入37°C 水浴，并不时摇动，在3分钟之内使其完全融化。

　　3、在冻存管中加入少量完全培养基，再将细胞混合液移入含有该细胞完全培养基的离心管中，样品和培养基比例为1：10，然后轻轻吹打，混合均匀。

　　4、离心后去除上清，收集细胞沉淀。

　　5、轻轻弹松细胞沉淀，加入适量培养液后接种于培养瓶或培养皿中，轻轻晃动使细胞分布均匀，置于37℃孵箱中培养。

　　特别说明

　　使用LiveCyte冻存液之前放在四度冰箱预冷，在常温条件下放置的时间不宜过长，以免影响冻存效率。