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细胞培养的注意事项有哪些?

        
1. 认真按照操作规程进行实验,一般不大会导致污染,很多情况下是由于所用的试剂或培养基有污染而使实验失败,
2. 粉末培养基配制好后(加了血清),一般在4度尽量不要超过1个月,如在-20度存放时间可长一些,但最好也不要超过3-4个月,可能对于永生化细胞株来说要求不是太高,但我在过去的4年里一直是作原代细胞培养的,细胞娇弱,经验表明放置时间不宜过长。
3. 关于实验用品的清洗与消毒,我的经验是:用过的玻璃器皿先在清水中浸泡30min以上,然后加少许清洗剂,以超声波洗涤30min左右,(如无超声波洗涤器可用软毛刷轻轻刷洗干净),捞出晾干,再在铬酸洗液中浸泡6-18h(或过夜)后,自来水清洗10-15遍,双蒸水清洗3-4遍,晾干,高压消毒后即可使用。
许多塑料制品也可以高压消毒,例如培养瓶盖,胶塞,吸头等。不能用于高压的一般均已制成一次性作用的商品了,当然如果 money有限,如进口的培养板、皿等,也可以重复使用1-2次,我当时使用方法是将其完全清洁后,使用前在紫外灯下敞开照射1-1.5h即可,我做过多次,没有出现问题。塑料培养瓶由于清洗消毒不便,最好不要重复使用,如一定要重复用,可用环氧乙烷等消毒,(消毒后一定要放置半年以上方可使用)
在光镜下,上皮细胞通常呈“铺路石”样排布,细胞之间有拉丝现象(即距离较远的细胞可以通过细长的触手相连),细胞有成片生长的特性。而间质细胞通常呈梭形,没有有成片生长的特性,细胞之间的联系不紧密。但是细胞的形态特征会因为生长条件的改变而改变,如HeLa细胞是上皮细胞,但是在酸性培养条件下会变为梭形。
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