农药对乙酰胆碱酯酶的抑制率的大小主要取决于农药的分子结构。当农药分子中含有起作用的强吸电子基团时，磷酰基与乙酰胆碱酯酶的丝氨酸羟基就愈容易结合，在一定时间内，抑制率就愈大。当然，对于一定的农药，在预反应中，抑制环境温度和抑制时间及农药浓度等都是影响抑制率大小的因素。所以在预反应中，应尽可能地保证环境温度、抑制时间以及农药浓度的一致。有些农药刚配制好时测试的抑制率较大，几天后同样农药同样条件再测试时可能抑制率又降低，这就是因为部分农药已经降解，起不到抑制作用所致。