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甘油三酯(TG)常用测定酶法中,为什么采用推荐方法—去除游离甘油的二步酶法优于一步酶法?

        

血脂异常是动脉粥样硬化性疾病的重要危险因素之一,甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、高密度与低密度脂蛋白胆固醇(HDL-CLDL-C)是四项基本指标。临床上制定四项血脂的合适水平或异常水平的划分标准、治疗指针及治疗目标,必须在血脂测定结果准确性的基础上进行。由于TG的脂肪酸组成复杂,而且血中还有游离甘油与不完全甘油酯,使TG测定的结果的准确性显得尤其重要。TG测定的常规方法,国内普遍采用甘油磷酸氧化酶法,也是检验学会的推荐方法,但目前因为商品试剂大都未用二步酶法去除游离甘油,这对多数住院病人是不合适的。

[测定原理]

标本中的游离甘油经第1试剂中甘油激酶(GK)作用,最后生成过氧化氢,再经过氧化氢酶分解成H2O,使游离甘油的影响被消除;另外,维生素C由维生素C氧化酶去除。第2试剂中TG等经脂蛋白脂酶(LPL)等作用所产生的过氧化氢,在POD的作用下,使4-氨基安替比林(4-AA)与HDAOS发生氧化缩合,生成紫色的醌色素,通过测定该色素的增加,求出TG浓度。以SYSMEX公司生产的二步酶法TG测定试剂盒为例:


第一步反应:

抗坏血酸 + 1/2O2 AOD 脱氢抗坏血酸 + H2O

游离甘油 + ATP GK 3-磷酸甘油 + ADP

3-磷酸甘油 + O2 GPO 磷酸二羟丙酮 + H2O2

H2O2 过氧化氢酶 H2O + 1/2O2

第二步反应:

甘油三酯 + 3H2O LPL 甘油 + 3分子游离脂肪酸

甘油 + ATP GK 3-磷酸甘油 + ADP

3-磷酸甘油 + O2 GPO磷酸二羟丙酮 + H2O2

2H2O2 + 4-AA + HDAOS POD 醌类染料

[参考值 ]

高甘油三酯血症: 1.69mmol/L以上(150mg/dL以上)。

[说明]

  1. 现阶段允许一步酶法与两步酶法并存,要求逐步过渡到统一采用两步法。在未统一方法前,实验室报告TG测定结果时应注明“去FG值”或“未去FG值”,这将有助于临床医生对结果的正确判断。
  2. 正常人血清FG浓度平均约0.11mmol/L(10mg/dl),在糖尿病、服用含甘油的药物、静脉营养、情绪应急、血标本污染时,FG将明显增高,以致影响对TG水平的判断。
  3. 国外学者建议:临床实验室应备有可以去FG空白的试剂,供必要时采用;糖尿病及特殊门诊以及TG>2.3mmol/L者,最好作FG空白校正。

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