在实验中固相萃取柱的选择与分类

　　1.柱压力方式选择

　　柱压力可分为：减压、加压、常压。减压柱能够减少固定相硅胶的使用量，缺点有：第一，大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发(有时在固相萃取柱外面有水汽凝结);第二，可能会造成易分解物质的损失;第三，抽气泵的使用，会延长过柱萃取时间，增加噪音。

　　固相萃取柱加压是一种较好的使用方式，特别适用于易分解样品的分离。加压可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集时间，缺点是：第一，减低柱子的塔板数;第二，压力过大，溶剂流速过快减低分离效果，所以柱加压在普通的有机化合物的分离中较适用。其他条件相同时，常压柱效率最高，但耗时，比如天然化合物的分离。

　　2.固相萃取柱的尺寸选择

　　理想的固相萃取柱类型应该是内径和长度均较大。柱长加大，相应的塔板数则高，柱内径较大，进样后样品的原点则小(反映在柱子上就是样品层较薄)，分离度变大。缺点是采用内径较大的萃取柱需较多的硅胶和溶剂，增加实验成本。现在常用萃取柱直径与长度比一般在1∶5～1∶10，固定相硅胶量是样品量的30～40倍。萃取柱较短内径较小，相应的塔板数则低，进样后样品的原点则大(反映在柱子上就是样品层较厚，样品层在固相萃取柱内小于0.5cm，各组分较容易完全分离)，分离度变小。

　　如果所需组分和杂质分离度较大(所需组分分离度R>1)，使用硅胶较少、内径较小的萃取柱(例如200毫克的样品，用2cm×20cm的柱子);如果所需组和杂质分离度较小(所需组分分离度R<1)，可以加大萃取柱内径，也可使用极性较小的淋洗剂等。

　　3.无水无氧柱

　　无水无氧柱适用于对氧、水敏感、易分解的产品，可以湿柱，也可以干柱。由于溶剂和硅胶饱和时放出热量可能导致分析样品中化合物的分解，样品过柱前要用溶剂将萃取柱饱和一次。分离较敏感物质，必须选用密封的接收瓶，遵循Schlenk操作，至于是加压、常压、减压，随需而定。

　　氧化铝常用作无水无氧柱的固定相。氧化铝可以做成碱性、中性和酸性的，选择范围较大，但成本较高。硅胶中有大量的羟基裸露在外，样品容易分解，尤其是金属有机化合物和含磷化合物，一般较少使用。

　　4.关于湿法、干法上样

　　湿法上样操作简单，一般用淋洗剂溶解样品，常用溶剂如二氯甲烷、乙酸乙酯等，为防止溶剂成为淋洗剂，溶剂越少越好。有些样品在上柱前较粘稠，但对结果影响较小，有些浓度较大样品上样后在硅胶上有析出现象，分析原因是硅胶对样品的吸附达到饱和，而样品本身溶解度较低造成的，遇到这种情况应该先重结晶，得到大部分的化合物后再做柱分离，如果不能重结晶，直接过柱，样品随着淋洗剂流动会自动溶解。

　　若有些样品溶解性差，溶解的溶剂又不能上柱(比如DMF、DMSO等，会随着溶剂一起走，显色有个很长的脱尾)，此时必须用干法上柱。样品和硅胶的量的比例为1∶1，总量越少越好，分离结果要保证在旋干后，无明显固体颗粒析出(说明有的样品没有吸附在硅胶上)。

　　5.淋洗剂的选择

　　5.1淋洗剂的要求a.挥发性小，在操作温度下有较低蒸汽压，以免流失;b.热稳定性好，在操作温度下不发生分解;c.对试样组分有适当的溶解能力;d.具有较高的选择性，即对沸点相同或相近的不同物质有尽可能高的分离能力;e.化学稳定好，不与被测物质发生化学反应。

　　5.2淋洗剂的选择

　　(1)分离非极性物质，一般选用非极性淋洗剂，这时试样中的各组分按沸点次序先后流出。

　　(2)分离极性物质，选用极性淋洗剂，这时试样中的各组分按极性顺序分离，极性较小的先流出，极性较大的后流出。

　　(3)分离非极性与极性混合物时，一般选用极性淋洗剂，这时非极性部分先流出，极性部分后流出。

　　(4)对于能形成氢键的试样，如醇、酚等的分离，一般选择极性的或是氢键型的淋洗剂，这时各组分按与淋洗剂之间形成的氢键能力大小先后流出。

　　(5)对于较难分离的物质，可以用两种或两种以上的淋洗剂。有时我们为了节约成本经常购买大包装或桶装的淋洗剂，这些大多是工业用品，杂质较多，所以在比较严格的柱分时有必要对溶剂重蒸(过原料时就可以节省次步骤)。另外溶剂在过柱子后也回收利用，一方面环保，另一方面也能节约部分经费，缺点是耗时。过柱时石油醚和乙酸乙酯的挥发度不同会导致极性的变化，一般会导致极性变大，此方式较适合梯度淋洗。样品过柱分离后，为防止减压旋蒸时有部分低沸点杂质吸出，溶剂最后回收要采用常压，这时纯化回收效果较好。