高效液相色谱法操作规程

　　操作过程：

　　在开机之前，根据所做样品的方法要求，准备好所用流动相，标样及样品。流动相0.22μm膜抽滤后超声脱气30分钟。A、B两相中，则A管道连接蓝盖瓶的水相，B管道连接蓝盖瓶的有机相。确保每天用重新超声和超滤过的水和有机相。所有样品过膜（0.22或0.45μm滤膜）后使用。

　　开机步骤：

　　依次打开电脑→泵→柱温箱→检测器→打开LC solution→点击“1分析”听见“滴滴”两声待自检通过→打开“文件”中“方法文件夹”调出方法，平衡压力30分钟左右即可进样。

　　进样步骤：

　　打开左栏框内“单次运行”→载入“方法文件”和“数据文件”后点击“确定”→进样阀上扳、进样打针、下扳、取针，自动开始走样。

　　关机步骤：

　　试验结束后用水相（有盐离子时必须用水冲洗干净时间最少1小时）或有机溶剂冲洗管道（半小时以上），冲洗结束后分两种情况：

　　1，第二天继续做样：流速调小约0.1ml/min（确保AB两相不能走空，蓝盖瓶内溶液足够）→关闭检测器光源→关闭柱温箱（第二天做实验依次打开柱温箱和检测

　　器光源）

　　2，长期不用：根据色谱柱保存要求进行封柱（如PAHs专用柱：用100%乙睛1.0 ml/min冲洗1个小时左右）→关掉检测器光源→关掉仪器→关软件（“滴”一声）→关泵→关电脑。

　　方法建立：

　　建立色谱操作方法：

　　建立色谱操作方法（参数设置：流动相 AB 比例，流速，柱温箱，波长的设置）。注意保存为自己命名的 Method，勿覆盖或删除他人的方法及实验结果；标准曲线的建立：

　　配置一系列标准浓度梯度的标液，一般采取逐级稀释的方法（5-8 个点）。具体步骤参照仪器使用说明 P18-P24 页。

　　数据处理：

　　“再解析”里读取最终浓度，誊抄到自己的记录本上。