高效液相色谱仪的组成和各个部件的功能简介

　　HPLC 由高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、信号采集等五大部分组成。分析前，检查是否是合适的色谱柱和流动相，开泵，冲洗柱子，待柱子达到平衡而且基线平直后，用液相专用微量平头进样器进样，流动相把样品带入色谱柱进行分离，分离后的组分依次流入检测器的流通池，最后和洗脱液一起排入流出物收集器。当有样品组分流过流通池时，检测器把组分浓度转变成电信号，经过放大，信号采集输出至电脑经过处理形成色谱图。色谱图是定性、定量

　　和评价柱效高低的依据。

　　高压输液系统：高压输液泵是 HPLC 关键部件之一，其功能是将溶剂贮存器中的流动相以高压形式连续稳定送入液路系统，使样品在色谱柱中完成分离过程。进样系统：包括进样口、注射器和进样阀等，它的作用是把分析试样有效地送入

　　色谱柱中进行分离。

　　分离系统：包括色谱柱、恒温器和连接管等部件。色谱柱一般用内部抛光的不锈钢制成，其内径为2~ 6mm，柱长为10~50cm，我们柱温箱可以使用小于300mm色谱柱，内部充满微粒固定相，柱温根据文献设定。

　　检测系统：荧光检测器和紫外检测器

　　荧光检测器 (Fluorescence Detector,简称 FLD) 是 HPLC 常用的一种检测器。用紫外线照射色谱馏分，当试样组分具有荧光性能时，即可检出。选择性高，只对荧

　　光物质有响应;灵敏度也高，适合于多环芳烃（PAHs）及各种荧光物质的痕量分析。每种物质对应特定的激发波长和发射波长，根据参考文献进行所测样品的两

　　个波长设置。

　　紫外检测器（Ultraviolet Detector）是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器，其工作原理是 Lambert-Beer 定律，即当一束单色光透过流动池时，若流动相不吸收光，则吸收度 A 与吸光组分的浓度 C 和流动池的光径长度 L 成正比。物理上测得物质的透光率，然后取负对数得到吸收度。大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外或可见光吸收基团，因而有较强的紫外或可见光吸收能力，因此 UVD 既有较高的灵敏度，也有很广泛的应用范围，是液相色谱中应用最广泛的检测器。每种物质对应特定的吸收波长，根据参考文献进行所测样品的两个

　　波长设置。

　　信号采集：液相色谱工作站对检测器信号进行采集，集成处理数据，形成色谱图。