高效液相色谱仪的泵贵吗？

　　高效液相色谱仪作为实验室里必不可少的分析仪器之一，是由进样系统、高压输液系统和检测系统、分离系统以及记录系统组成。在分析之前，选取适合的色谱柱和 流动相，开泵，冲洗柱子，等柱子达到平衡而且基线平直后，用微量注射器将样品注入进样口，流动相把试样带入色谱柱进行分离，分离后的组分再依次流入检测器 的流通池，最后与洗脱液一起排入流出物收集器。当样品组分流过流通池的时候，检测器会把组分浓度转变成一种电信号，再经过放大处理，通过记录器记录下来 得到色谱图。我们依据色谱图来对样品进行定性、定量和评价柱效高低。这就是高效液相色谱仪的工作原理。其中高效液相色谱仪组成部分里最重要的是泵。那么高效液相色谱仪的泵贵吗？

　　柱子和简单点的检测器都可以自己造，但是泵就不行。高精度的泵是很重要的，不止在液相，蠕动泵在流动注射，原子荧光等都很重要。 这一点必须要承认国内和国际的差距还是很大，非常大。要赶上几乎是不可能，因为这些技术不是十几二十年就能弥补的。像安捷伦、赛默也是买别人的泵，自己也 造不了，或者是没精力造。国产的精密仪器刚开始几年还能用，越用越烂，最后恨不得把机器砸了买新的。说到底还是制造业差距，国人不能安安静静做一个制造 商，缺少工匠精神。

　　说到泵，又分为多元高压泵和低压泵，那么多元高压泵和低压泵的区别是什么呢：所谓几元，指的是能同时控制流路的多少。多元泵又分为高压混合与低压混合。高压混合又叫泵后混合，多元高压泵由多个泵构成，有几元则有几个泵，例如 奥普斯二元高压梯度泵、奥普斯系列的四元高压梯度泵等。低压混合又称泵前混合，其实就是一个泵，几元就是安装几路电磁阀，例如 奥普斯四元低压梯度泵等。

　　四元高压梯度：配置有四个可独立工作的泵+在线混合器。工作方式为四个泵并联，可同时有四个流动相，按照预先设定的配比进入，分别送液到泵后的混合室内， 在高压下进行混合，混合配比更准确，不易产生气泡，不用为了转换流动相而反复清洗，不仅节省溶剂，也提高了工作效率。无需增加真空脱气机，降低了混合死体 积（泵前混合时、混合管、泵头等体积，脱气机内死体积）。同时，可以做梯度洗脱：当待测样品成分复杂，用一个固定的流动相配比无法将样品中成分完全分开时 ，就需要用到梯度洗脱，在同一个分析过程中由仪器自动改变流动相配比，将样品中前期无法分离的物质进行洗脱，在同一谱图中得到分开的峰的效果。有助于提高 分析准确性，避免了遗漏重要物质或对其进行错误定性定量。

　　然而，四元低压梯度：配置比较繁琐：由单泵+低压混合比例阀（电磁阀）+在线脱气机+混合器构成，它的工作方式也与高压梯度泵有很大区别：最多可同时有四个 流动相进入流路，按照预先设定的配比进行混合，是依靠电磁阀的切换使泵分段输送不同流动相，由于在常压下混合，气泡很容易从溶剂中析出，较易产生气泡，因 此必须配备在线脱气机，可消除气泡影响。可以做梯度洗脱，在仪器上进行设定之后，在同一样品分析工程中，相隔一段时间后，按照用户的设定自行改变流动相配 比，将样品中组分分离开来。

　　目前HPLC仪器制造厂家大都推出四元低压梯度（带在线脱气）系统，而在数年前大都是二元高压梯度，以往四元低压系统通常是进口仪器的专属产品，国内大多采取 高压混合的方式，并没有涉及到低压系统的应用开发，在国内有些招标项目中也有明确提出选用四元低压的案例，广大客户可能会误以为四元低压是进口仪器的先进 技术，实则不然，四元低压实际上是对二元高压的补充，也就是说当比例发生改变的流动相数量较多，二元高压不能满足分析的时候，四元低压弥补了这一不足。但 如果比例发生改变的流动相数量在2个以内，包括2个，应该来说二元高压梯度系统在作高精度分析时优势明显。从目前的售价看，四元低压的泵比二元高压的并低不 了太多，但他们节约的成本是不少的。

　　四元低压梯度系统采用单泵加梯度比例阀来实现，因为比例阀是在泵前的，并且各流路的溶剂在比例阀里就混合在一起了，所以是泵前、低压混合。一般地，对于常 规分析来说，四元低压梯度也可以满足需要；如果分析样品成份复杂、对重现性要求较高，或者需要在低流量下进行梯度分析，还是选择高压梯度好一些。当然，现 在德国Aupos（奥普斯）公司推出的四元高压梯度泵，在保证高精度分析的同时，也解决了流动相数量受限制问题。

　　液相色谱从性能上比较，四元高压肯定优于四元低压。四元高压的混合比例是通过改变泵的流速来获得的，通常泵的流速都是很准的，所以混合的精度也是很高的。 四元低压梯度的混合比例是通过控制不同流路的电磁阀的开闭时间长短来控制的，理论上混合的比例也是准确的，但是实际上电磁阀的开闭会有一个延迟，无论它动 作多么快，总还是需要一点时间的。比如A路和B路各50%混合，在单位时间内，A路和B路的电磁阀各开通50%的时间，这时问题不大，电磁阀的延迟影响可以通过调整 补偿系数来尽量弥补。但是如果极端一点的情况，A路99%，B路1%，这种情况下单位时间内，A路的电磁阀开通99%的时间，B路只占 1%，时间是很短的，这时B路电磁 阀的延迟就影响很大了，甚至可能延迟的时间比工作的时间还要长。这是两个管路的情况，假如四个管路同时工作，其结果可想而知。高压梯度就不会存在这种问题 了。此外，低压还应注意清洗，尤其使用缓冲盐时，电磁阀送液管路很容易堵住。